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中文名：總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)

供應(yīng)商：上海遠(yuǎn)慕

規(guī)格：120T

有效期： 12個月有效。蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制成溶液后應(yīng)-20℃凍存。 

用途：定量檢測血清、組織樣本中總蛋白含量。

本產(chǎn)說明：酶標(biāo)儀檢測540nm處吸光值。

系列：生化檢測

適用范圍：本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。

總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)多用于人或動物血清、血漿、組織等樣本中的總蛋白含量測定。雙縮脲反應(yīng)的原理是在呈藍(lán)色的堿性硫酸銅溶液存在的情況下，銅離子與肽鍵形成有色螯合的銅復(fù)合物，呈紫色，所產(chǎn)生的顏色密度與參與反應(yīng)肽鍵數(shù)成比例?？赏ㄟ^比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長為540nm。雙縮脲法測定蛋白濃度兼容性亦很好，不受大部分樣本中其他成分的影響，但易受銅離子螯合劑影響。

總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)操作步驟：

1.取1ml蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液或稀釋液加入到蛋白標(biāo)準(zhǔn)中，充分溶解后配制成20mg/ml的 蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制后可立即使用，溶解后的蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液應(yīng)-20℃保存。亦可按自己試驗要求繼續(xù)進(jìn)行稀釋，如稀釋至1mg/ml。特別提示：待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標(biāo)準(zhǔn)也宜溶解于什么樣的稀釋液中。例如待測蛋白溶解于蔗糖中，亦取蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶解于蔗糖中。一般也可以用NaCl或PBS作為溶解白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液。

2.鹽水或PBS，冰浴下勻漿后，離心，取上清待檢。

3.TP加樣操作，按下表依次加入試劑：

4.混勻,孵育。   

5.準(zhǔn)孔和各待測孔的吸光度。  

6.當(dāng)遇到渾濁或溶血樣本等，可設(shè)”樣本空白孔”：取待測樣品加入雙縮脲空白試劑，以雙縮脲空白試劑調(diào)零，讀取樣本空白孔吸光度。用待測孔吸光度減去標(biāo)本空白孔吸光度后的凈吸光度，計算總蛋白濃度。

總蛋白檢測試劑盒(雙縮脲微板法)注意事項：

1.蛋白標(biāo)準(zhǔn)粉末溶解于蛋白標(biāo)準(zhǔn)配制液后，即獲得蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液，該原液中含有防腐劑， 不影響后續(xù)檢測，該蛋白標(biāo)準(zhǔn)原液-20℃長期保存。  

2.待測蛋白和蛋白標(biāo)準(zhǔn)加入雙縮脲試劑后，如果發(fā)現(xiàn)檢測效果不佳，可以室溫放置1h或 60℃放置15min，顏色會隨著時間的延長不斷加深。  

3.測定標(biāo)準(zhǔn)曲線時發(fā)現(xiàn)隨著標(biāo)準(zhǔn)品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化，可能的原因 是樣品中含有銅離子螯合劑。  

4.如果沒酶標(biāo)儀，也可以使用分光光度計測定。使用分光光度計測定蛋白濃度時，每個 試劑盒可以測定的樣品數(shù)量可能會顯著減少。  

5.檢測中發(fā)現(xiàn)所有孔都呈暗紫色，可能原因是樣品含有還原劑，應(yīng)適當(dāng)透析或稀釋樣品。