蛋白酶抑制劑混合物（100×，哺乳動物樣品提取用）

規(guī)格：1ml /5×1ml

儲存條件：-20℃保存，有效期一年。

產(chǎn)品簡介

蛋白酶抑制劑混合物(哺乳動物樣品抽提用, 100×)  (Protease  inhibitor cocktail  for mammalian cell and tissue extracts, 100×) 是一種用于哺乳動物細胞或組織蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物(100mMAEBSF,  80μM  Aprotinin,5mMBestatin,1.5mME64,2mMLeupeptin and1mMPepstatin A in DMSO)，并提供獨立包裝的0.5MEDTA。

哺乳動物細胞或組織提取物中含有許多內(nèi)源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易導(dǎo)致提取物中的蛋白降解或去修飾，從而影響后續(xù)的蛋白檢測。因此在提取物中添加適當(dāng)?shù)牡鞍酌?、磷酸酶等抑制劑是防止蛋白降解和去修飾的有效方法?br/>
本產(chǎn)品為經(jīng)優(yōu)化和測試的用于哺乳動物細胞或組織蛋白提取的蛋白酶抑制劑混合物，包含了廣譜的絲氨an酸、半胱an氨酸和酸性蛋白酶抑制劑、以及氨基肽酶抑制劑。

本產(chǎn)品使用便捷，通常以1:100的比例分別把蛋白酶抑制劑混合物和0.5MEDTA加入裂解液中，如用于檢測金屬蛋白酶活性，則不宜添加EDTA。

本產(chǎn)品可以有效抑制哺乳動物細胞或組織提取物中的各種蛋白酶活性，如絲氨an酸蛋白酶、氨基肽酶、半胱氨an酸蛋白酶、蘇氨an酸和天冬氨酸蛋白酶、金屬蛋白酶等。其中AEBSF是一種水溶性的絲氨an酸蛋白酶不可逆抑制劑，其抑制常數(shù)與PMSF和DFP的抑制常數(shù)相似，可以有效抑制胰yi蛋白酶(trypsin)、糜mi蛋白酶(chymotrypsin)、纖溶酶(plasmin)、激肽釋放mei酶(kallikrein)和凝ning血酶(thrombin)等蛋白酶，作為PMSF和DFP的替代物，AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液穩(wěn)定性更好。Aprotinin是絲氨an酸蛋白酶的競爭性可逆抑制劑；Bestatin是氨基肽酶可逆抑制劑；E64是半胱氨an酸蛋白酶不可逆抑制劑；Leupeptin是絲an氨酸和半胱an氨酸蛋白酶可逆抑制劑；Pepstatin A是天冬氨酸蛋白酶可逆抑制劑；EDTA作為螯合劑是金屬蛋白酶的可逆抑制劑。

一個包裝的本產(chǎn)品通常足夠用于100ml裂解液的配制。

使用方法：

1.本蛋白酶抑制劑混合物為100×的儲存液，使用時按照1:100的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制劑混合物)，混勻后即可使用。根據(jù)需要，0.5M的EDTA也按照1:100的比例加入到裂解液中（如用于檢測金屬蛋白酶活性，則不宜添加EDTA）。含有蛋白酶抑制劑混合物的裂解液宜現(xiàn)用現(xiàn)配，不宜配制后凍存待后續(xù)使用。

2. 待所需的抑制劑添加完畢混勻后，就可以開始進行哺乳動物組織的裂解和蛋白提取。提示：蛋白酶抑制劑混合物盡量避免反復(fù)凍融，第一次使用后，可按照每次使用量分裝凍存。family:Arial'>1:100的比例加入到裂解液中。

3. 待所需的抑制劑添加完畢混勻后，就可以開始進行常規(guī)細胞或組織的裂解和蛋白提取。提示：蛋白酶抑制劑混合物盡量避免反復(fù)凍融，第一次使用后，可按照每次使用量分裝凍存。